寄生蟲(chóng)卵檢測(cè)制片（改良加藤氏法）

衛(wèi)生部辦公廳關(guān)于印發(fā)《全國(guó)土源性線蟲(chóng)病監(jiān)測(cè)方案》的通知

一、背景

土源性線蟲(chóng)（鉤蟲(chóng)、蛔蟲(chóng)、鞭蟲(chóng)和蟯蟲(chóng)等）在我國(guó)分布廣泛，感染人數(shù)眾多，嚴(yán)重危害人民群眾的身體健康，阻礙經(jīng)濟(jì)發(fā)展和社會(huì)進(jìn)步。2005年衛(wèi)生部公布的全國(guó)人體重要寄生蟲(chóng)病現(xiàn)狀調(diào)查結(jié)果顯示，全國(guó)土源性線蟲(chóng)感染率為19.56％，推算感染人數(shù)達(dá)1.29億，表明我國(guó)土源性線蟲(chóng)感染率仍處于較高水平，這與我國(guó)當(dāng)前構(gòu)建和諧社會(huì)的要求不相適應(yīng)。為及時(shí)掌握我國(guó)土源性線蟲(chóng)病的流行動(dòng)態(tài)和流行規(guī)律，為制定土源性線蟲(chóng)病防治策略與措施、評(píng)價(jià)防治效果提供科學(xué)依據(jù)，有必要在全國(guó)范圍內(nèi)有計(jì)劃、連續(xù)、系統(tǒng)地開(kāi)展土源性線蟲(chóng)病監(jiān)測(cè)。根據(jù)《2006-2015年全國(guó)重點(diǎn)寄生蟲(chóng)病防治規(guī)劃》，特制訂《全國(guó)土源性線蟲(chóng)病監(jiān)測(cè)方案》。

二、監(jiān)測(cè)目的

（一）了解土源性線蟲(chóng)病流行動(dòng)態(tài)及影響因素，掌握流行規(guī)律，預(yù)測(cè)流行趨勢(shì)。

（二）為制訂防治對(duì)策和評(píng)價(jià)防治效果提供科學(xué)依據(jù)。

（三）為國(guó)家和地方衛(wèi)生城市（城鎮(zhèn)）創(chuàng)建工作提供相關(guān)評(píng)價(jià)依據(jù)。

三、監(jiān)測(cè)病例定義

本方案的監(jiān)測(cè)病例是指在人群中開(kāi)展土源性線蟲(chóng)病原學(xué)檢查時(shí)，發(fā)現(xiàn)鉤蟲(chóng)、蛔蟲(chóng)、鞭蟲(chóng)和蟯蟲(chóng)等蟲(chóng)卵或蟲(chóng)體者即為土源性線蟲(chóng)病病例。

四、監(jiān)測(cè)內(nèi)容

（一）監(jiān)測(cè)點(diǎn)監(jiān)測(cè)

1.確定原則

（1）根據(jù)全國(guó)土源性線蟲(chóng)感染率分類(lèi)布點(diǎn)；

（2）監(jiān)測(cè)點(diǎn)人群土源性線蟲(chóng)感染率應(yīng)相當(dāng)于所在省、自治區(qū)、直轄市人群的平均感染水平；

（3）監(jiān)測(cè)點(diǎn)所在縣（市、區(qū)）具有一定的工作基礎(chǔ)，能夠主動(dòng)配合并承擔(dān)一定的監(jiān)測(cè)任務(wù)。

2.監(jiān)測(cè)點(diǎn)分布

按照分類(lèi)布點(diǎn)的原則全國(guó)共設(shè)22個(gè)監(jiān)測(cè)點(diǎn)：

（1）感染率大于20％的地區(qū)共10個(gè)點(diǎn)：海南、貴州、四川、廣西、湖南、重慶、福建、湖北、江西、云南；

（2）感染率5％～20％的地區(qū)共7個(gè)點(diǎn)：安徽、廣東、山東、甘肅、青海、河南、江蘇；

（3）感染率小于5％的地區(qū)共5個(gè)點(diǎn)：黑龍江、上海、河北、山西、北京。

3.監(jiān)測(cè)點(diǎn)的確定程序

（1）監(jiān)測(cè)點(diǎn)應(yīng)固定在一個(gè)行政村或若干自然村，總?cè)丝跀?shù)一般不少于1500人，每次受檢人數(shù)不少于1000人。

（2）監(jiān)測(cè)點(diǎn)由省級(jí)疾病預(yù)防控制中心或寄生蟲(chóng)病防治所選擇確定，并報(bào)中國(guó)疾病預(yù)防控制中心備案。

（3）監(jiān)測(cè)點(diǎn)一經(jīng)確定，原則上5年內(nèi)不變動(dòng)。

4.監(jiān)測(cè)內(nèi)容與方法

（1）人群感染情況監(jiān)測(cè)

①內(nèi)容：鉤蟲(chóng)、蛔蟲(chóng)、鞭蟲(chóng)及蟯蟲(chóng)，檢查到其它蟲(chóng)種一并登記。

②對(duì)象：年齡在3周歲以上的常住居民。

③方法：每年9～11月份采用改良加藤厚涂片法（一糞三檢），3～12周歲兒童加做透明膠紙肛拭法檢測(cè)蟯蟲(chóng)卵。

④指標(biāo)：鉤蟲(chóng)、蛔蟲(chóng)、鞭蟲(chóng)分別計(jì)算感染率和感染度，蟯蟲(chóng)計(jì)算感染率。

（2）土壤中人蛔蟲(chóng)卵污染情況監(jiān)測(cè)

①土壤采樣點(diǎn)：每個(gè)監(jiān)測(cè)點(diǎn)隨機(jī)抽取10戶，每戶采集菜園、廁所周邊、庭院、廚房四類(lèi)地點(diǎn)的土樣。

②采樣量：每戶每類(lèi)地點(diǎn)1份，每份30克。

③檢查方法：鏡檢受精或未受精蛔蟲(chóng)卵，土壤培養(yǎng)法區(qū)別死活受精蛔蟲(chóng)卵。

④指標(biāo)：分別計(jì)數(shù)人的蛔蟲(chóng)卵、受精蛔蟲(chóng)卵和培養(yǎng)后活受精蛔蟲(chóng)卵。

（3）相關(guān)因素調(diào)查

調(diào)查監(jiān)測(cè)點(diǎn)的地理環(huán)境、氣溫、濕度、降雨、農(nóng)作物、經(jīng)濟(jì)水平、衛(wèi)生狀況、防治措施等自然和社會(huì)因素。

（二）城市（城鎮(zhèn)）14歲以下兒童蛔蟲(chóng)感染監(jiān)測(cè)

擬申報(bào)國(guó)家和地方衛(wèi)生城市（城鎮(zhèn)）的地區(qū)需進(jìn)行城市（城鎮(zhèn)）14歲以下兒童蛔蟲(chóng)感染監(jiān)測(cè)。其它地區(qū)可根據(jù)本地寄生蟲(chóng)病防治規(guī)劃和需求，參照本方案開(kāi)展監(jiān)測(cè)工作。

1.樣本量：總?cè)丝跀?shù)在50萬(wàn)以上的城市，調(diào)查人數(shù)不少于1500人；總?cè)丝跀?shù)在50萬(wàn)以下的城市，調(diào)查人數(shù)不少于1000人。

2.抽樣方法：在城區(qū)和郊區(qū)各隨機(jī)抽取2所學(xué)校，對(duì)14歲以下各年級(jí)學(xué)生開(kāi)展蛔蟲(chóng)感染監(jiān)測(cè)，每年級(jí)至少調(diào)查100人。

3.檢查內(nèi)容：蛔蟲(chóng)卵。

4.檢查方法：采用改良加藤厚涂片法（一糞三檢）檢查糞便標(biāo)本，觀察蛔蟲(chóng)感染情況。

5.指標(biāo)：蛔蟲(chóng)感染率和感染度。

五、數(shù)據(jù)收集、分析和反饋

（一）監(jiān)測(cè)點(diǎn)數(shù)據(jù)的收集、分析和反饋

1.中國(guó)疾病預(yù)防控制中心負(fù)責(zé)建立并下發(fā)統(tǒng)一的監(jiān)測(cè)點(diǎn)調(diào)查數(shù)據(jù)庫(kù)軟件。

2.省級(jí)疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)監(jiān)測(cè)點(diǎn)數(shù)據(jù)的收集和錄入，并于次年1月15日前將數(shù)據(jù)庫(kù)與年度監(jiān)測(cè)報(bào)告報(bào)中國(guó)疾病預(yù)防控制中心。

3.中國(guó)疾病預(yù)防控制中心負(fù)責(zé)對(duì)全國(guó)所有監(jiān)測(cè)點(diǎn)數(shù)據(jù)進(jìn)行匯總、分析后，于次年3月底前將監(jiān)測(cè)結(jié)果反饋各省、自治區(qū)、直轄市。

（二）城市（城鎮(zhèn)）14歲以下兒童蛔蟲(chóng)感染監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)的收集

凡開(kāi)展14歲以下兒童蛔蟲(chóng)感染監(jiān)測(cè)的城市（城鎮(zhèn)），由當(dāng)?shù)丶膊☆A(yù)防控制機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)收集、錄入和管理監(jiān)測(cè)資料，并將監(jiān)測(cè)結(jié)果報(bào)當(dāng)?shù)匦l(wèi)生行政部門(mén)和愛(ài)衛(wèi)會(huì)，作為申報(bào)國(guó)家和地方衛(wèi)生城市（城鎮(zhèn)）的評(píng)價(jià)依據(jù)。

六、質(zhì)量控制

（一）培訓(xùn)

中國(guó)疾病預(yù)防控制中心寄生蟲(chóng)病預(yù)防控制所負(fù)責(zé)對(duì)承擔(dān)監(jiān)測(cè)點(diǎn)工作任務(wù)的省級(jí)業(yè)務(wù)骨干進(jìn)行培訓(xùn)。各省、自治區(qū)、直轄市負(fù)責(zé)本地區(qū)監(jiān)測(cè)點(diǎn)技術(shù)培訓(xùn)。

（二）督導(dǎo)檢查

中國(guó)疾病預(yù)防控制中心負(fù)責(zé)組織對(duì)監(jiān)測(cè)點(diǎn)工作進(jìn)行督導(dǎo)檢查，檢查內(nèi)容包括監(jiān)測(cè)工作計(jì)劃的完成情況、人員培訓(xùn)及技術(shù)規(guī)范的落實(shí)等。

（三）鏡檢質(zhì)量控制

中國(guó)疾病預(yù)防控制中心寄生蟲(chóng)病預(yù)防控制所負(fù)責(zé)組織對(duì)監(jiān)測(cè)點(diǎn)鏡檢結(jié)果進(jìn)行復(fù)檢，對(duì)每個(gè)監(jiān)測(cè)點(diǎn)至少抽檢30%的陽(yáng)性片（如陽(yáng)性片不足10片則全部檢查），假陽(yáng)性率不得超過(guò)10%；陰性片至少抽檢5%，假陰性率不得超過(guò)10%。中國(guó)疾病預(yù)防控制中心寄生蟲(chóng)病預(yù)防控制所應(yīng)及時(shí)反饋和公布監(jiān)測(cè)點(diǎn)鏡檢質(zhì)控結(jié)果。

備注：

為了節(jié)省各單位時(shí)間，便于開(kāi)展工作，現(xiàn)推薦“廣州市宜康生物科技有限公司"為寄存蟲(chóng)卵檢測(cè)制片盒（改良加藤氏法）的特定供應(yīng)商，：。

附：說(shuō)明書(shū)

寄生蟲(chóng)卵檢測(cè)制片盒使用說(shuō)明書(shū)

（改良加藤氏法）

簡(jiǎn)介：改良加藤氏法是世界衛(wèi)生組織（WHO）推薦的檢測(cè)寄生蟲(chóng)卵方法，可同時(shí)檢測(cè)蛔蟲(chóng)卵、鉤蟲(chóng)卵、肝吸蟲(chóng)卵等等。本檢測(cè)制片盒輔助用于顯微鏡檢測(cè)糞便中寄生蟲(chóng)蟲(chóng)卵，可提高寄生蟲(chóng)檢測(cè)效果并能定量分析感染度。

檢測(cè)包組成：

1、復(fù)合染液1瓶        20毫升/瓶

2、定量板              100片

3、刮片                100片

4、尼龍網(wǎng)              100張

5、玻璃紙              100張（22毫米*30毫米）

6、載璃片              100片

操作步驟：

1、將尼龍絹片置于待檢糞樣上，用塑料刮片在其上輕刮，使細(xì)糞渣透過(guò)尼龍絹孔上，取過(guò)濾后的糞便。
2、將定量板放在載玻片中部，然后把刮片上的細(xì)糞渣填入定量板的圓孔內(nèi)，使其填滿全孔并抹平、小心移走定量板，使糞樣留在玻片上。

3、取1張浸泡好的親水玻璃紙，抖掉多余的透明液，蓋在糞樣上，用一塊較厚的載玻片輕壓，使糞便均勻地展開(kāi)于玻璃紙下。
4、將制備好的加藤片放于標(biāo)本盒內(nèi)（內(nèi)墊吸水紙）。

5、編號(hào)后置室溫25℃、濕度75%時(shí)約1小時(shí)或30~36℃溫箱中約半小時(shí)后鏡檢。

鏡檢及結(jié)果判斷：

1、鏡檢：將透明好的加藤片置光學(xué)顯微鏡的載物臺(tái)上，在低倍鏡（10×）下鏡檢。鏡檢仔細(xì)檢查每一個(gè)視野，并特別注意與未受精蛔蟲(chóng)卵的鑒定。計(jì)數(shù)全片蟲(chóng)卵（計(jì)數(shù)原則：數(shù)上不數(shù)下，數(shù)左不數(shù)右）。

2、加藤片的蟲(chóng)卵計(jì)數(shù)：以鏡檢每片檢出的蟲(chóng)卵數(shù)的24倍數(shù)（一糞一檢），即為每克糞便蟲(chóng)卵數(shù)（EPG）。

計(jì)算3張加藤片的血吸蟲(chóng)卵數(shù)分別為A、B、C，每克糞便蟲(chóng)卵數(shù)（EPG）為：（A+B+C） ×8（一糞三檢）。

注意事項(xiàng)：

1、每份糞樣需做三張涂片（一糞三檢，以提高檢出率）

2、裁好的玻璃紙要捻開(kāi)一片片放入透明液中，切忌整疊放入，以免內(nèi)部浸不透，而影響透明效果；浸泡時(shí)間不能少于24小時(shí)。

3、對(duì)薄殼蟲(chóng)卵，如鉤蟲(chóng)卵等的透明時(shí)間zui長(zhǎng)不能超過(guò)2小時(shí)，避免因透明過(guò)度而漏檢。

4、糞便過(guò)硬時(shí)，加少許清水或透明液浸泡片刻，再行刮取。

5、定量板一定要置于載玻片的中部，如果定量板偏于一側(cè)，則制片后玻片邊緣的糞膜不能進(jìn)入鏡檢視野內(nèi)而產(chǎn)生漏檢。
6.制作標(biāo)本時(shí)，應(yīng)防止過(guò)分干燥，以免蟲(chóng)卵變形或破裂，以致影響蟲(chóng)卵鑒別。
7.糞渣透明的速度取決于溫、濕度和糞膜的厚度，一般放置室溫即可，冬天則需置溫箱中以加快透明。如糞膜過(guò)厚，則不易尋找蟲(chóng)卵。

本檢測(cè)制片包于常溫保存，24個(gè)月內(nèi)有效。

規(guī)格：100人份/包  僅供研究，不作臨床診斷！

寄生蟲(chóng)卵檢測(cè)制片（改良加藤氏法）