登革熱檢測(cè)ELISA試劑盒
澳大利亞Panbio公司一直在登革熱（Dengue fever）、羅斯河熱（Ross riverfever）的診斷試劑產(chǎn)品方面保持著*的市場(chǎng)地位。Panbio
登革熱產(chǎn)品擁有zui廣的產(chǎn)品系列，有著zui廣的應(yīng)用。
預(yù)期作用：
Panbio登革熱快速檢測(cè)試劑盒是用來(lái)定量檢測(cè)人血清、血漿和全血中的登革熱病毒IgM和IgG抗體的方法。這方法能用來(lái)鑒別初次和二次感染。它僅能用來(lái)檢測(cè)具有臨床登革熱癥狀的病人的樣本。結(jié)果是假定陽(yáng)性的，必須經(jīng)病毒分離、雙份血清分析、免疫組織化學(xué)檢測(cè)抗原或病毒核酸檢測(cè)證實(shí)有登革熱病毒感染。
原理：
在處理病人樣本時(shí)，登革熱特異性IgM和IgG抗體和包埋在橫過(guò)盒膜的兩條線上的抗-人IgM和IgG抗體相結(jié)合。膠態(tài)金復(fù)合物包含重組登革熱1~4型抗原被病人的IgM和IgG捕獲而顯現(xiàn)出粉紅色的線。設(shè)定一個(gè)對(duì)照程序來(lái)指示方法操作正確。
試劑盒組成：
每個(gè)試劑盒包括下面的東西，數(shù)量足夠能完成包裝袋標(biāo)簽上標(biāo)明的測(cè)試份數(shù)。
•25小包。每包里面有一個(gè)試劑盒和一個(gè)10µL的MicroSafe®移液管。
•1份使用說(shuō)明書(shū)。
•1管3ml的緩沖液（含有0.1% Proclin）
必要的但不提供的材料
•計(jì)時(shí)器
一般程序
MicroSafe®移液管的操作方法
MicroSafe®移液管能用來(lái)吸全血、血漿或血清。
在吸液時(shí)請(qǐng)嚴(yán)格遵照下面的使用說(shuō)明（圖1）：
1.水平地拿著移液管。
2.吸液時(shí)，移液管的和測(cè)試樣本接觸（見(jiàn)下圖1）。
3.輕輕地?cái)D泡排出樣本。
注意：在吸液時(shí)，不要擠泡；它會(huì)自動(dòng)充滿的。
樣本收集和準(zhǔn)備：
1.靜脈血在室溫下（20~25oC）會(huì)凝結(jié)成塊，然后根據(jù)全國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)（NCCLS）（收集診斷靜脈血的認(rèn)可標(biāo)準(zhǔn)程序，H3-A4, 1998）進(jìn)行離心。
血清應(yīng)盡快分離并冷藏（2~8oC）或是冷凍（-20oC），如果在兩天內(nèi)不試驗(yàn)的話，應(yīng)冷凍在更低的溫度下。黃疸血清、有溶血的、脂血的或是有細(xì)菌生長(zhǎng)的血清都不推薦使用
2.不推薦使用自我解凍的致冷機(jī)來(lái)貯存樣本，因?yàn)樗芤饦颖窘?jīng)過(guò)凍融周期和降低抗體水平，因此產(chǎn)生假結(jié)果。
3.指端血采集后要馬上測(cè)試。NCCLS建議含有EDTA或肝素作為抗凝劑的全血可以不經(jīng)離心就立即使用，或者也可以在2~8oC放上72小時(shí)（血樣處理加工的認(rèn)可標(biāo)準(zhǔn)程序，H18-A2, 1999）
4.發(fā)熱開(kāi)始后樣本的采集時(shí)間決定了試驗(yàn)的準(zhǔn)確度。在發(fā)熱開(kāi)始后的6~14天采得的樣本能得到*的結(jié)果。
測(cè)試程序：
注意：在開(kāi)始實(shí)驗(yàn)前確保所有的試劑平衡至室溫（20-25°C）。
要用時(shí)，才從袋內(nèi)拿出試劑盒和MicroSafe®移液管。
. 用微量移液器或是提供的MicroSafe®移液管在圓孔內(nèi)加入10µL的全血、血清或血漿。
. 讓樣品*吸收融入圓孔里的樣品墊內(nèi)。
. 在方孔上方1cm處垂直地拿著緩沖瓶。
. 在試劑盒底部的方孔內(nèi)加入2滴緩沖液。
. 加緩沖液的剛剛15分鐘后讀結(jié)果。
. 在測(cè)試區(qū)域內(nèi)出現(xiàn)粉紅色線的痕跡就表明陽(yáng)性結(jié)果。
. 超過(guò)15分鐘后讀取的結(jié)果將認(rèn)為是無(wú)效的，必須要重做。
錯(cuò)誤的使用用法
1.加液時(shí)，瓶子不能水平。
2.加液時(shí)，瓶子不能接觸到樣品孔
質(zhì)量控制：
1.如果沒(méi)有出現(xiàn)對(duì)照線，則測(cè)試無(wú)效得重做。如果測(cè)試無(wú)效，則病人結(jié)果不能報(bào)告。
2.全血樣品可能會(huì)在視窗內(nèi)出現(xiàn)紅色的背景值。如果它沒(méi)有遮蓋住測(cè)試線則結(jié)果有效。
3.質(zhì)量控制需要必須遵照當(dāng)?shù)氐?、州?或國(guó)家法律或委任書(shū)和你們實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量程序。建議用戶參照NCLSI C24-A和42 CFR 493.1202（c）中的合適的質(zhì)量控制實(shí)踐指導(dǎo)
結(jié)果解釋：
登革熱初次感染表現(xiàn)為發(fā)熱后3~5天能檢測(cè)到IgM抗體。二次感染表現(xiàn)為感染發(fā)作后的1~2天特異性IgG水平升高，還經(jīng)常伴有IgM水平的升高。應(yīng)該結(jié)合IgM和IgG測(cè)試線來(lái)解釋結(jié)果。單獨(dú)的線分析可能不夠準(zhǔn)確。
C：對(duì)照線 M：IgM測(cè)試線 G：IgG測(cè)試線
初次感染
在IgM和對(duì)照區(qū)域出現(xiàn)粉紅色條帶
測(cè)試說(shuō)明IgM抗體陽(yáng)性，且表明有初次登革熱感染。
二次感染
在IgM、IgG和對(duì)照區(qū)域出現(xiàn)粉紅色條帶
測(cè)試說(shuō)明IgM和IgG抗體陽(yáng)性，且表明二次登革熱感染。
二次感染
在IgG和對(duì)照區(qū)域出現(xiàn)粉紅色條帶
測(cè)試說(shuō)明IgG抗體陽(yáng)性，且表明二次登革熱感染。
陰性
僅僅在對(duì)照區(qū)域出現(xiàn)粉紅色條帶
沒(méi)有檢測(cè)到IgM和IgG抗體。結(jié)果不能排除登革熱感染。如果懷疑有登革熱感染，則在3~4天后重新測(cè)試。
無(wú)效
在對(duì)照區(qū)域沒(méi)有出現(xiàn)粉紅色條帶
測(cè)試無(wú)效得重做。
僅供研究，不作臨床診斷！
登革熱檢測(cè)ELISA試劑盒
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